1、将液体石蜡分装于三角烧瓶内，塞上棉塞，并用牛皮纸包扎，1.05kg/cm，121℃灭菌30分钟，然后放在40℃温箱中，使水汽蒸发掉，备用。
2、将需要保藏的菌种，在最适宜的斜面培养基中培养，使得到健壮的菌体或孢子。
3、用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡，注入已长好菌的斜面上，其用量以高出斜面顶端1cm为准，使菌种与空气隔绝。
4、将试管直立，置低温或室温下保存（有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长）。
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